Génération in vitro de cellules tueuses activées par Bacillus Calmette-Guérin

Une régression tumorale induite chez des patients cancéreux par instillation locale de bacille de Calmette-Guérin BCG dans la vessie est considérée comme médiée par des réactions immunitaires et inflammatoires cellulaires. Afin d’élucider lesquels de ces effets sont pertinents pour l’activité tumoricide, un système in vitro a été utilisé. dans lequel les effets immunostimulateurs du BCG pourraient être étudiés Ce rapport décrit l’induction de cellules BAK activées par le BCG, qui lysent efficacement les cellules tumorales vésicales. Les cellules mononucléaires du sang périphérique humain PBMC ont été stimulées avec BCG v-BCG et s-BCG respectivement pour générer des cellules BAK La cytotoxicité des cellules BAK était comparable à la cytotoxicité exercée par les cellules LAK tueuses activées par lymphokine générées par l’interféron IFN-γ mais n’atteignait pas le niveau de cellules LAK générées par IL-interleukine. avec v-BCG et non avec s-BCG Par appauvrissement et enrichissement de populations cellulaires définies, le potentiel cytotoxique de BA Les cellules K pourraient être attribuées à une population de lymphocytes CD et CD double positifs Des macrophages et des cellules CD étaient nécessaires pour l’induction de l’activité de destruction, mais n’avaient pas cette activité par eux-mêmes En outre, la présence d’IFN-y et IL- dans les surnageants récoltés A partir de ces résultats, il est conclu que l’effet bénéfique connu de l’instillation locale de BCG sur le maintien de l’état sans rechute dans le cancer de la vessie superficielle peut être dû à l’effet bénéfique connu de la cytokinèse. à la génération locale de cellules BAK

Plusieurs phénomènes d’immunothérapie intravésicale au BCG pour le cancer de la vessie superficielle récidivante chez l’homme ont été décrits, comme l’infiltration de la paroi vésicale et la sécrétion de cytokines dans l’urine Cependant, jusqu’à présent, on ignorait quels phénomènes En fait, nous avons établi un système in vitro pour disséquer les effets immunobiologiques de la thérapie. Ce rapport se concentre sur la contribution des composants de l’immunité cellulaire. Nous avons demandé si la co-incubation avec Des études antérieures ont montré que les cellules tumorales de la vessie résistantes aux cellules NK étaient détruites par des cellules LAK générées par les lymphokines et activées par IL. LAK pourrait rendre les cellules mononucléaires du sang périphérique cytotoxiques contre les cellules tumorales vésicales résistantes aux cellules NK. les cellules sont une population diversifiée de lymphocytes qui expriment les marqueurs de cellules NK, su ch comme CD et CD, ou marqueurs de cellules T, tels que CD ou CD Leur cytotoxicité n’est pas un complexe majeur d’histocompatibilité MHC-restrictedCe rapport décrit la génération de cellules tueuses activées par BCG par co-incubation de PBMC avec BCG v-BCG viable mais pas avec sonication BCG s-BCG et analyse ces cellules effectrices en ce qui concerne leur phénotype et la voie d’activation En outre, le phénomène de cellules tueuses activées par BCG BAK est comparé au système de cellules LAK

Matériaux et méthodes

Cellules effectrices Pour générer des cellules BAK, des PBMC à partir de sang héparinisé de donneurs humains sains ont été obtenues par centrifugation Ficoll-Paque Pharmacia, Uppsala, Suède Les cellules ont été ajustées à une concentration de × / mL en milieu RPMI- complet Biochrom, Berlin contenant% sérum humain et % de pénicilline / streptomycine Biochrom v-BCG Aventis Pasteur [Toronto] sous-substrat [Immucyst], × cfu / mL ou s-BCG μg / mL a été ajouté, et les cellules BAK ont été cultivées pendant plusieurs jours dans des plaques de microtitration à ° C en% CO La sonification du BCG a été réalisée selon la méthode de Harboe et al. Des cellules LAK ont été générées en parallèle avec IL-U natif humain / mL; aimablement fourni par le Dr H Mohr, Service de transfusion sanguine de Basse-Saxe, Springe, Allemagne ou IFN-γ U / mL humain recombinant; aimablement fourni par Boehringer, Mannheim, AllemagnePour exclure les macrophages dans la destruction des cellules cibles, les macrophages ont été éliminés par phagocytose du fer. En bref, les PBMC stimulées par le BCG ont été récoltées et ajustées à une concentration cellulaire de × / mL. sérum de veau fœtal et poudre de fer mg / mL; Fluka, Buchs, Suisse ont ensuite épuisé des cellules phagocytant des particules de fer au moyen d’un aimant Pour tester l’implication des monocytes dans l’induction des cellules BAK, les lymphocytes et les monocytes ont été séparés par élutriation à contre-courant, comme décrit ailleurs Le lymphocyte la fraction a été encore purifiée par filtration sur fil de nylon La pureté des fractions de monocytes et de lymphocytes était>%, comme confirmé par coloration avec du LeuM anti-CD; Becton Dickinson, Heidelberg, Allemagne et préparations anti-CD Leub, Becton Dickinson, respectivement La fraction lymphocytaire contenait <% monocytes, comme déterminé par chimiluminescence Pour la caractérisation des populations cellulaires effectrices, des cellules CD et CD ont été préparées à partir du BCG- les PBMC stimulées et le contrôle non stimulé, respectivement, par sélection positive avec des billes magnétiques Dynabeads M- / CD et Dynabeads M- / CD; Dynal, Hambourg, Allemagne et le système detach-a-billes Dynal, Hambourg, Allemagne Des cellules stimulées par BCG étaient épuisées de cellules CD avec des billes magnétiques Dynabeads M- / CD PBMC étaient appauvries en cellules CD par incubation avec anti-CD Leu; Becton Dickinson, suivi de billes magnétiques recouvertes d'anticorps de chèvre contre les Ig Dynabeads de souris M- Des échantillons de cellules des populations dérivées ont été analysés par cytométrie de fluxPour caractériser le rôle des sous-ensembles de cellules T pendant l'induction des cellules BAK, les PBMC étaient appauvries en Cellules T CD Des expériences d'épuisement ont été réalisées avec l'utilisation de billes magnétiques Dynabeads M- / CD et M- / CD comme recommandé par le fabricant Une analyse subséquente par cytométrie de flux a révélé <% de cellules résiduelles Inhibition de l'activité lymphokine Pour clarifier l'implication des lymphokines pendant BCG- induction médiée de la cytotoxicité, anticorps monoclonaux qui neutralisent l'IL-clone BG; Serva, Heidelberg, Allemagne ou IFN-γ clone GZ; Boehringer ont été ajoutés à une concentration de μg / mL au début de la culture PBMC non stimulés servis de témoins dans l'essai de cytotoxicité Cellules cibles Les cellules de la lignée de cellules tumorales résistantes aux cellules NK, résistantes aux cellules LAK BT-A par le Dr J van der Bosch, Forschungszentrum Borstel, Borstel, Allemagne ont été utilisés comme cellules cibles Le clone cellulaire a été établi directement à partir d'un échantillon chirurgical La lignée cellulaire d'érythroleucémie humaine K sensible aux cellules NK a également été utiliséeCyotoxicity assay de la méthode décrite par Leibold et Bridge Comparée à l'isotope Cr, fréquemment utilisé, la [H] méthionine est plus facile à manipuler mais nécessite une plus longue période de co-incubation des cellules effectrices et cibles Pour mesurer la cytotoxicité, les cellules cibles sont radiomarquées par incubation avec L- Activité spécifique de [H] méthionine, - Ci / mmol; Amersham Buchler, Braunschweig, Allemagne - cellules μCi / - × dans du milieu RPMI sans L-méthionine Biochrom additionné de% de sérum de veau fœtal, de pénicilline et de streptomycine Après plusieurs étapes de lavage, les cellules cibles ont été ensemencées à × cellules / μL par puits sur-plaques Falcon; Becton Dickinson On a laissé les cellules cibles adhérer pendant h. Ensuite, le milieu a été renouvelé et les cellules effectrices ont été ajoutées aux rapports de:,:, et: dans des tests de μL / wellAll en triple. Pour déterminer la libération spontanée, les cellules cibles ont été cultivé sans cellules effectrices La libération maximale a été mesurée après lyse complète des cibles en% SDS /% d'EDTA Triton X- / mM. Après un temps de co-incubation de h, les plaques ont été centrifugées pendant min. On a récolté dans chaque puits des ul de surnageant et on les a transférés dans des flacons Pony Canberra-Packard, Francfort-sur-le-Main, Allemagne, contenant un ml de fluide de scintillation Rotiscint Eco Plus; Roth, Karlsruhe, Allemagne La radioactivité a été mesurée dans un compteur bêta de Canberra-Packard et la lyse spécifique a été déterminée selon la formule suivante: Lyse spécifique% = x Exp - Spo / Max - Spo, où Exp est la libération expérimentale, Spo la spontanée version, et Max la version maximale

Résultats

Génération de cytotoxicité induite par le BCG Des cellules PBMC et PBMC fraîchement isolées cultivées avec ou sans stimulus ont été testées pour leur cytotoxicité vis-à-vis des cellules tumorales vésicales et des cellules K Elles ont été stimulées par IL-, IFN-γ ou BCG pendant plusieurs jours. optimal pour l’induction de la cytotoxicité des cellules BAK [données non présentées] Nous avons trouvé que les PBMC cultivées fraîchement isolées et non stimulées étaient peu ou pas du tout capables de tuer les cellules tumorales vésicales, alors que cette population était cytotoxique vers les cellules K Des cellules ont été observées avec des cellules LAK induites par IL- ou IFN-γ comme cellules effectrices. Cependant, IL- était plus efficace que IFN-γ Figure Le degré de lyse cellulaire exercé par les cellules BAK a atteint le niveau des cellules LAK générées par IFN-γ. Dans les expériences de contrôle, aucune cytotoxicité directe du BCG vis-à-vis des cellules tumorales vésicales n’a été trouvée.

Figure Vue largeTélécharger le profil cellulaire des lymphocytes tueurs activés par lymphokine et activés par BCG Des cellules mononucléaires fraîches de sang périphérique PBMC et PBMC cultivées pendant des jours avec ou sans stimulus ont été testées dans un test de cytotoxicité avec utilisation de différentes populations de cellules cibles BT-A et K les lignées cellulaires; voir texte IL-, IFN-γ et BCG ont été utilisés comme stimulus Les cellules effectrices et cibles ont été co-incubées pour h à différents rapports effecteur-cible Les données sont tirées d’une expérience représentative des autres Chaque valeur est la moyenne de trois cultures SD Cibler les cellules mononucléaires fraîches de sang périphérique PBMC et PBMC cultivées pendant des jours avec ou sans stimulus ont été testées dans un test de cytotoxicité avec l’utilisation de différentes populations de cellules cibles BT, & lt;% Figure Vue large -A et K lignées cellulaires; voir texte IL-, IFN-γ et BCG ont été utilisés comme stimulus Les cellules effectrices et cibles ont été co-incubées pour h à différents rapports effecteur-cible Les données sont tirées d’une expérience représentative des autres Chaque valeur est la moyenne de trois cultures SD Pour une meilleure comparaison avec les cellules BAK, les cellules LAK ont été cultivées pendant plusieurs jours. Ces cellules LAK présentaient encore une cytotoxicité prononcée envers les cellules tumorales vésicales viagrapourfemme.net. Lorsque la cytotoxicité vis-à-vis des cellules K est évaluée, il faut noter la cytotoxicité des cellules LAK la plus élevée. Dans les expériences décrites ci-dessus, nous avons utilisé le v-BCG pour générer une cytotoxicité antitumorale induite par le BCG. Cependant, nous avons été incapables d’améliorer la cytotoxicité des PBMC non stimulées en utilisant des -BCG en tant que stimulateur La cytotoxicité des cellules mononucléaires traitées par le s-BCG n’a pas dépassé le niveau de contrôle

Figure Vue largeTélécharger la lameCytotoxicité des cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC stimulée par BCG et BCG s-BCG Les cellules tueuses activées par IL-lymphokine IL- et les PBMC non stimulées non stimulées ont été utilisées comme témoins Pour plus de détails, voir figure Chaque valeur est la moyenne Cystotoxicité des cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC stimulée par le BCG et BCG s-BCG Les cellules tueuses induites par lymphokine IL-IL et les PBMC non stimulées non stimulées ont été utilisées comme témoins Pour plus de détails, voir la figure Chaque valeur est La caractérisation de la sous-population de cellules BAK dans les PBMC Les expériences suivantes ont été conçues pour caractériser la sous-population de PBMC auxquelles appartiennent les cellules BAK cytolytiques. Dans un premier temps, après stimulation des PBMC par le BCG pendant plusieurs jours, les macrophages sont appauvris. n’a pas réduit la cytotoxicité induite par le BCG, nous concluons que les macrophages d En outre, les sous-populations de lymphocytes T ont été examinées pour leur potentiel BAK vers les cellules cancéreuses de la vessie. Un enrichissement de sélection positif des cellules CD et CD a été effectué, et la cytotoxicité a été analysée dans chaque fraction de CD. les cellules n’étaient pas cytotoxiques vis-à-vis des cellules tumorales vésicales, mais l’activité cytolytique était détectable dans la fraction CD

Figure Vue largeTélécharger la lameCytotoxicité des cellules BAK activées par le BCG avant et après la déplétion des macrophages Les cellules Mφ BAK ont été générées par co-incubation avec le BCG pendant plusieurs jours La cytotoxicité de ces cellules BAK a été déterminée avant et après épuisement des macrophages par la phagocytose. Cytotoxicité des cellules BAK activées par le BCG avant et après la déplétion des macrophages Les cellules Mφ BAK ont été générées par co-incubation avec le BCG pendant plusieurs jours La cytotoxicité de ces cellules BAK a été déterminée avant et après la déplétion des macrophages par la phagocytose du fer. des cultures en triple

Figure Vue largeTéléchargement de la cytotoxicité des cellules tueuses activées par le BCG La cytotoxicité des cellules tueuses activées par le BCG a été déterminée dans la population complète A après sélection positive des cellules CD B après épuisement des cellules CD des cellules CD et après sélection positive. Cellules non stimulées ○ servies comme témoins Chaque valeur est la moyenne des cultures en tripleFigure View largeTélécharger la lameCytotoxicité des sous-populations de cellules T vers les cellules tumorales vésicales La cytotoxicité des cellules tueuses activées par BCG a été déterminée dans la population complète A après sélection positive de CD cellules B, après épuisement des cellules CD des cellules CD C, et après sélection positive des cellules CD D Cellules non stimulées ○ servies de témoins Chaque valeur est la moyenne des cultures en triple. Une caractérisation plus poussée de cette sous-population de cellules cytotoxiques a été réalisée par épuisement des cellules CD. la sous-population CD Enlèvement de cette fraction CD au sein de la population CD ab Cela a été testé dans une autre expérience dans laquelle des cellules CD ou CD ont été retirées des PBMC après stimulation par le BCG. Les deux procédures ont conduit à une élimination presque complète de la cytotoxicité envers les cellules PB et CD. cellules cancéreuses de la vessie, confirmant que la cellule effectrice BAK est la figure CDCD

Figure Vue largeTélécharger la lameCytotoxicité des cellules tueuses activées par le BCG avant et après la déplétion des cellules CD et CD Des billes magnétiques ont été utilisées pour la déplétion, et les populations cellulaires résultantes ont été analysées par cytométrie en flux &% de contamination Pour plus de détails, voir PBMC, sang périphérique Cytotoxicité des cellules tueuses activées par le BCG avant et après la déplétion des cellules CD et des cellules CD Des billes magnétiques ont été utilisées pour la déplétion, et les populations cellulaires résultantes ont été analysées par cytométrie en flux & lt;% de contamination Pour plus de détails, voir la figure PBMC, cellules mononucléées du sang périphérique. Chaque valeur est la moyenne des cultures en triple. Cellules nécessaires pour l’induction des cellules BAK L’implication des monocytes dans la génération des cellules BAK a été examinée en séparant les PBMC en monocytes et lymphocytes par élutriation à contre-courant. passage de la fraction lymphocytaire Une population de cellules T purifiée et, parallèlement, des populations cellulaires contenant des monocytes reconstitués à des teneurs définies ont été stimulées par le BCG pendant plusieurs jours et ensuite utilisées comme cellules effectrices. Dans la population de lymphocytes T purifiés, activité cytolytique vers les cellules cancéreuses de la vessie. Dans des expériences dans lesquelles la stimulation a été effectuée avec une population cellulaire contenant plus de% de monocytes, on a observé une restauration de la cytotoxicité des cellules BAK. En revanche, l’utilisation du stimulus IL-as a entraîné la génération de cellules cytotoxiques. à partir de lymphocytes T purifiés en l’absence de monocytes données non montrées

Figure Vue largeDownload slideInfluence des monocytes sur la génération de cellules tueuses activées par BCG Les cellules mononucléaires périphériques sanguines ont été séparées en monocytes et lymphocytes par élutriation à contre-courant et par filtration à travers une colonne de laine de nylon Purifiées T et populations de lymphocytes T contenant différentes quantités de monocytes ont été stimulés avec BCG • ou ont été laissés non stimulés ○ La cytotoxicité vis-à-vis des cellules cancéreuses de la vessie a été déterminée, et le rapport cellules effectrices / cellules cibles était: Chaque valeur est la moyenne des cultures triples. cellules Les cellules mononucléaires du sang périphérique ont été séparées en monocytes et lymphocytes par élutriation à contre-courant et par filtration à travers une colonne de nylon. Les lymphocytes T purifiés et les populations de lymphocytes T contenant différentes quantités de monocytes ont été stimulés par BCG ou non stimulés. cellules w comme déterminé, et le ratio cellule effecteur-cible était: Chaque valeur est la moyenne des cultures en triple L’expérience suivante a été conçue pour tester la contribution des cellules CD et CD au processus d’induction de la cytotoxicité antitumorale induite par le BCG PBMC étaient appauvri en CD et CD ont été stimulés avec BCG ou IL- pendant des jours L’absence de cellules CD pendant la période d’induction a complètement aboli la cytotoxicité induite par le BCG, alors que l’induction des cellules LAK n’a pas été compromise Un effet similaire a été observé lorsque les PBMC étaient appauvries des cellules T CD: la cytotoxicité médiée par le BCG a été diminuée, mais la génération de cellules LAK par IL- n’a pas été affectée

Figure Vue grandDownload slideInduction de cellules tueuses activées par BCG et lymphokine activées en présence ou absence de lymphocytes T CD ou CD Les cellules mononucléaires de sang périphérique PBMC ou PBMC appauvri en lymphocytes T CD ou CD ont été stimulées avec IL- ou BCG pendant des jours Cellules ont été récoltés, et la cytotoxicité vis-à-vis des cellules tumorales de la vessie a été déterminée. Une expérience représentative est montrée; Induction des cellules tueuses activées par le BCG et activées par les lymphokines en présence ou en l’absence de lymphocytes T CD ou CD Les cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC ou PBMC appauvries en lymphocytes T CD ou CD ont été stimulées avec: IL- ou BCG pendant des jours Les cellules ont été récoltées, et la cytotoxicité vers les cellules tumorales de la vessie a été déterminée Une expérience représentative de est montrée; chaque valeur est la moyenne des cultures en triple exemplaires. Cytokines requises pour l’induction des cellules BAK Pendant la phase d’induction des cellules BAK, de faibles quantités d’IL- et des quantités relativement élevées d’IFN-γ jusqu’à ng / mL le jour de la culture étaient détectables dans le surnageant. les données de culture non montrées Cependant, ces cytokines ne contribuent pas directement à la cytotoxicité médiée par le BCG, car elles n’étaient pas elles-mêmes cytotoxiques vis-à-vis des cellules tumorales vésicales. Génération de cellules BAK L’addition d’anticorps monoclonaux GZ et BG, qui neutralisent IFN-γ et IL- respectivement, a entraîné une forte diminution de la cytotoxicité induite par le BCG.

Figure View largeTableau de téléchargementInfluence des anticorps anti-IL- et anti-IFN-γ sur l’induction de cellules tueuses activées par le BCG Les cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC ont été stimulées en présence ou en absence des anticorps neutralisants PBMC non stimulés servant de témoins de cytotoxicité cellules Les cellules ont été récoltées après des jours, et la cytotoxicité vis-à-vis des cellules tumorales de la vessie a été déterminée. Une expérience représentative est montrée; Influence des anticorps anti-IL- et anti-IFN-γ sur l’induction des cellules tueuses activées par le BCG Les cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC ont été stimulées en présence ou en l’absence des anticorps neutralisants PBMC non stimulés servi de contrôles pour la cytotoxicité des cellules non stimulées Les cellules ont été récoltées après jours, et la cytotoxicité vers les cellules tumorales de la vessie a été déterminée Une expérience représentative sur est montré; chaque valeur est la moyenne des cultures en triple

Discussion

Contrairement à l’efficacité du BCG en application clinique, les mécanismes immunologiques impliqués dans ses actions antitumorales sont encore loin d’être compris. Dans des expériences avec des souris nudes athymiques, l’implication des cellules T a été observée: après transfert adoptif des splénocytes sensibilisés au BCG. Par conséquent, nous voulions élucider davantage les mécanismes cellulaires de la cytotoxicité induite par le BCG vis-à-vis des cellules tumorales vésicales et ainsi étudier si l’activation des PBMC par le BCG pouvait générer une activité cytolytique contre les cellules tumorales. En outre, nous avons analysé différents paramètres de cette réponse en ce qui concerne la préparation du BCG nécessaire, le phénotype de la cellule BAK, et les sous-populations lymphocytaires et les cytokines nécessaires pour l’induction de la cytotoxicité médiée par le BCG. -BCG pendant des jours conduit à la génération de cellules effectrices cytotoxiques, efficacement ki D’une part, le BCG était très efficace dans la production de cellules tueuses antitumorales, mais d’autre part, il semblait n’avoir aucun effet sur la sensibilité des cellules cibles. Nous avons été incapables de détecter une différence dans la destruction du BCG. -naive par rapport aux cellules tumorales amorcées par le BCG S Brandau, données non publiées Une préparation de s-BCG n’a pas induit l’activité des cellules BAK Cette constatation confirme les observations précédentes et pourrait être due au fait que s-BCG ne contient que des protéines solubles manque de composants membranaires insolubles et de protéines associées qui pourraient être nécessaires pour la génération d’activité cytotoxique. En ce qui concerne le phénotype des cellules BAK, l’implication des cellules CD a été démontrée. La cytotoxicité vis-à-vis des cellules cancéreuses de la vessie diminuait. maintenu en sélectionnant positivement les cellules CD Pour mieux caractériser le phénotype de la cellule BAK, nous avons également étudié le marqueur de surface CD, qui est présent sur la cellule NK s, lymphocytes T de type NK et cellules LAK La déplétion de ces cellules provenant de PBMC stimulées par le BCG ou de cellules CD présélectionnées ayant entraîné la disparition de l’effet cytolytique, nous concluons que les cellules BAK sont caractérisées par la coexpression de CD et CD Les cellules de ce phénotype sont connues pour augmenter dans les cultures de cellules LAK à long terme et semblent être responsables de l’activité antitumorale chez les patients cancéreux qui sont traités avec IL- D’autres expériences pour clarifier la caractérisation phénotypique du BAK Cellule, l’expression de CD est actuellement en coursLa contribution des cellules γδ-T, connues pour être régulées positivement par les protéines de choc thermique mycobactériennes , au phénomène des cellules BAK peut être exclue, puisque ces cellules ont été montrées CD- et CD -négatif Il est intéressant que les investigations immunohistochimiques des patients atteints de carcinome de la vessie traités au BCG ont prouvé que les cellules CD et les macrophages dominent dans l’infiltrat de la paroi de la vessie Dans la présente étude, nous avons démontré que Ni les cellules CD ni les macrophages n’ont participé à la destruction active des cellules tumorales vésicales. Cependant, nous avons pu montrer l’importance de ces populations cellulaires dans la phase d’induction de notre système in vitro. -activated killer cells Ces données in vitro sont en accord avec les données in vivo des patients et des souris. Dans l’urine des patients atteints de cancer de la vessie recevant un traitement BCG, la présence d’IL- et IFN-γ a été reconnue La nécessité de cellules T CD et CD dans la réaction antitumorale induite par le BCG a été décrite en ce qui concerne les CBL / souris. Par épuisement des cellules CD ou CD, la réponse antitumorale a été abrogée En évaluant la situation in vivo, il est Il est important de savoir si les cellules effectrices cytolytiques induites par le BCG présentent une spécificité pour les cellules malignes ou détruisent les cellules bénignes et malignes. Contrairement aux cellules LAK qui détruisent les cellules tumorales vésicales et les cellules urothéliales normales, BAK Cellules malignes S Brandau, données non publiéesSur la base de toutes nos données, nous suggérons que le BCG induit un sous-ensemble cytolytique de lymphocytes, qui lysent sélectivement les cellules allogéniques d’origine cancéreuse La génération de ces cellules dépend de l’interaction inductive des macrophages et CD Cellules T Nous proposons la description suivante de l’induction: par un mécanisme inconnu, le BCG est transféré dans l’urothélium puis phagocyté par les macrophages. De manière restreinte au CMH de classe II, les peptides BCG sont présentés aux cellules CD. Des expériences avec des anticorps neutralisants ont montré l’importance des cytokines pour l’induction de la cytotoxicité médiée par le BCG. D’un autre côté, la destruction elle-même semble être non liée au CMH dans notre système in vitro.

Remerciements

Nous apprécions grandement l’assistance technique d’I Goroncy, C Schneider, T Hempel et R Bergmann